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點板254nm和365nm紫外燈

作者:上海峰志儀器 時間:2023-04-12 08:41:32瀏覽3292 次

信息摘要:

LEAC-280L是為點板實驗用的紫外燈,內置了一根8w 254nm短波紫外線燈管和一根8w 365nm長波紫外線燈管,配有高效紫外濾光片,能夠將90%以上可見光過濾掉,讓點板顯色更清晰明亮;LEAC-280L紫外燈外殼采用了鋁合金材料,散熱快,能夠滿足長時間工作。LEAC-280L帶有手柄,可手提觀察,也可選配臺式支架和LCM-26A紫外觀察箱。

點板254nm和365nm紫外燈

LEAC-280L是為點板實驗用的紫外燈,內置了一根8w 254nm短波紫外線燈管和一根8w 365nm長波紫外線燈管,配有高效紫外濾光片,能夠將90%以上可見光過濾掉,讓點板顯色更清晰明亮;LEAC-280L紫外燈外殼采用了鋁合金材料,散熱快,能夠滿足長時間工作。LEAC-280L帶有手柄,可手提觀察,也可選配臺式支架和LCM-26A紫外觀察箱

點板254nm和365nm紫外燈

點板用雙波長紫外燈LEAC-280L(254nm和365nm)采用船型開關設計,一鍵轉換254nm和265nm波長,操作方便。配套的黑色支架阻隔可見光,讓顯色更清晰。

薄層色譜(TLC)是一種非常有用的跟蹤反應的手段,還可以用于柱色譜分離中合適溶劑的選擇。薄層色譜常用的固定相有氧化鋁或硅膠。流動相則是一種極性待選的溶劑。將溶液中的反應混合物點在薄板上,然后利用毛細作用使溶劑(或混合溶劑)沿板向上移動進行展開。根據混合物中組分的極性,不同化合物將會在薄板上移動不同的距離。極性強的化合物會“粘”在極性的硅膠上,在薄板上移動的距離比較短。而非極性的物質將會在流動的溶劑相中保留較長的時間從而在板上移動較大的距離。化合物移動的距離大小用Rf值來表達。這是一個位于0~1之間的數值,它的定義為:化合物距離基線(先點樣時已經確定)的距離除以溶劑的前鋒距離基線的距離。


薄層色譜(TLC)實驗步驟:

1) 切割薄板。通常,買來的硅膠板都是方形的玻璃板,必需用鉆石頭玻璃刀按照模板的形狀進行切割。在切割玻璃之前,用尺子和鉛筆在薄板的硅膠面上輕輕地標出基線的位置(注意不要損壞硅膠面)。借助鋒利的玻璃切割刀和一把引導尺,你便可方便地進行玻璃切割。當整塊玻璃被切割后,你就可以進一步將其分成若干獨立的小塊了。(開始的時候,也許你會感到有一些難度,但經過一些訓練以后,你便會熟練地掌握該項技術。)

2) 選取合適的溶劑體系。化合物在薄板上移動距離的多少取決于所選取的溶劑不同。在戊烷和己烷等非極性溶劑中,大多數極性物質不會移動,但是非極性化合物會在薄板上移動一定距離。相反,極性溶劑通常會將非極性的化合物推到溶劑的前段而將極性化合物推離基線。一個好的溶劑體系應該使混合物中的化合物都離開基線,但并不使化合物都到達溶劑前端,Rf值好在0.15~0.85之間。雖然這個條件不一定都能滿足,但這應該作為薄層色譜分析的目標(在柱色譜中,合適的溶劑應該滿足Rf在0.2~0.3之間)。那么,應該選取哪些溶劑呢?一些標準溶劑和他們的相對極性列于如下:

強極性溶劑:

甲醇〉乙醇〉異丙醇

中等極性溶劑:

乙腈〉乙酸乙酯〉氯仿〉二氯甲烷〉乙醚〉甲苯

非極性溶劑:

環己烷,石油醚,己烷,戊烷

常用混合溶劑:

乙酸乙酯/己烷:常用濃度0~30%。但有時較難在旋轉蒸發儀上完全除去溶劑。

乙醚/戊烷體系:濃度為0~40%的比較常用。在旋轉蒸發器上非常容易除去。

乙醇/己烷或戊烷:對強極性化合物5~30%比較合適。

二氯甲烷/己烷或戊烷:5~30%,當其他混合溶劑失敗時可以考慮使用。

3) 將1~2mL選定的溶劑體系倒入展開池中,在展開池中放置一大塊濾紙。

4) 將化合物在標記過的基線處進行點樣。我們用的毛細管是買來的,此外,毛細管也可從加熱過的Pasteur吸管上拔下。在跟蹤反應進行時,一定要點上起始反應物、反應混合物以及兩者的混合物。

5) 展開:讓溶劑向上展開約90%的薄板長度。

6) 從展開池中取出薄板并且馬上用鉛筆標注出溶劑到達的前沿位置。根據這個計算Rf的數值。

7) 讓薄板上的溶劑揮發掉。

8) 用非破壞性技術觀察薄板。好的非破壞性方法就是用紫外燈進行觀察。將薄板放在紫外燈下,用鉛筆標出有紫外活性的點。盡管在5.301中不用這種方法,但我們將采用另一常用的無損方法——用碘染色法。

9) 用破壞性方式觀測薄板。當化合物沒有紫外活性的時候,只能采用這種方法。在各種TLC顯色劑的調配方法中,提供了很多非常有用的染色劑。使用染色劑時,將干燥的薄板用鑷子夾起并放入染色劑中,確保從基線到溶劑前沿都被浸沒。用紙巾擦干薄板的背面。將薄板放在加熱板上觀察斑點的變化。在斑點變得可見而且背景顏色未能遮蓋住斑點之前,將薄板從加熱板上取下。

10) 根據初始薄層色譜結果修改溶劑體系的選擇。如果想讓Rf變得更大一些,可使溶劑體系極性更強些;如果想讓Rf變小,就應該使溶劑體系的極性減小些。如果在薄板上點樣變成了條紋狀而不是一個圓圈狀,那么你的樣品濃度可能太高了。稀釋樣品后再進行一次薄板層析,如果還是不能奏效,就應該考慮換一種溶劑體系。

11) 做好TLC標記,計算每個斑點的Rf值,并且在筆記本中畫出圖樣。


常見拖尾原因及解決辦法

1、首先考慮的是樣品濃度過大,薄層板過載導致。這種情況直接降低樣品濃度或者是上樣量就可以驗證了。

2、樣品對硅膠的吸附能力過強導致的拖尾。對不同體系加入不同的調節劑,酸體系加冰醋酸或甲酸,堿體系加氨水、三乙胺或二乙胺。

3、展開劑的極性與樣品極性不附,不能做到有效展開導致。可以通過調節展開劑極性解決。

4、如果是長帶狀,那可能的原因是展開劑對樣品的溶解度不夠所導致。可以根據極性表換極性相近的對樣品溶解度更好的溶劑做展開劑,另外樣品未溶解完全,點在班上的樣品有未溶固體樣品也會導致長條狀拖尾。


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