近日，中國農(nóng)業(yè)科學院作物科學研究所作物分子育種技術和應用創(chuàng)新團隊鑒定了RfxCas13d靶向RNA引發(fā)“反式切割”活性的基本特征，研制出基于RfxCas13d、LwaCas13a、LbCas12a與AsCas12a的多套核酸檢測工具，并研發(fā)出田間實時可視化靈敏定性定量檢測方法，為動植物病原體檢測提供了高效、低成本的開發(fā)途徑，具有廣闊的技術開發(fā)場景與應用價值。相關研究結(jié)果在線發(fā)表在《中國科學:生命科學（Science China-Life Sciences）》上。

　　據(jù)謝傳曉研究員介紹，植物真菌性病害、細菌性病害及病毒性病害嚴重危害作物生產(chǎn)與品質(zhì)安全，如禾谷鐮孢菌和擬輪枝鐮孢菌是玉米穗粒腐、莖腐病、小麥赤霉病的罪魁禍首；水稻黑條矮縮病毒則通過灰飛虱在水稻、小麥和玉米宿主之間遷移傳播，嚴重威脅水稻、小麥和玉米生產(chǎn)。建立快速、準確、靈敏及便攜的病原體診斷技術，可為病害的早期預警與綠色防控提供重要依據(jù)。

　　針對以上植物病害病原體，團隊成員研制了多套基于CRISPR-Cas12a和CRISPR-Cas13系統(tǒng)“反式切割”活性的病原體核酸診斷技術。通過優(yōu)化樣本處理方法，可實現(xiàn)田間實際樣本粗提物稀釋液的靈敏檢測，且可利用LUYOR-3415小型手持式熒光儀（熒光蛋白激發(fā)光源）或試紙條進行田間現(xiàn)場定性讀取結(jié)果。此外，以禾谷鐮孢與擬輪枝鐮孢菌復合侵染為樣本，建立了基于Cas12/Cas13聯(lián)合應用的復合檢測，實現(xiàn)了一個檢測能診斷判讀多種病原，進一步拓展了檢測工具的應用場景與潛力。此外，該系列檢測方法還可應用于食品安全質(zhì)量檢驗、動植物檢疫、轉(zhuǎn)基因檢測、動植物群體的基因分型與基因表達檢測等，具有重要的應用價值。

該研究得到自然科學基金和中國農(nóng)科院科技創(chuàng)新工程等項目資助。（通訊員：衛(wèi)斐）

　全文鏈接：http://engine.scichina.com/doi/10.1007/s11427-021-2028-x

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